基因治疗中不可或缺的AAV抗体

腺相关病毒（AAV）具有低致病性、低免疫原性、高基因递送能力，作为病毒载体广泛用于基因治疗领域。基于AAV载体的基因治疗也是美国和欧洲唯一获批的体内基因疗法。

图1 AAV治疗

AAV载体有多种优势，如：野生型的AAV未引发任何疾病；AAV在多种细胞中都能实现有效载荷的长期表达；AAV不具有强免疫原性等。目前超70%基因递送药物均采用AAV载体递送，尤其适用于肝脏、视网膜和中枢神经系统等组织。

AAV2

根据病毒衣壳蛋白的表面抗原差异进行分类，已发现数十种不同衣壳蛋白的AAV，不同的AAV具有不同的衣壳蛋白空间结构、序列和组织特异性。这些血清型在体内产生不同的抗血清类型。

图2 AAV三维结构, BCRF PDB ID: 1LP3

其中AAV2是最常见的血清型，与其他血清型的氨基酸序列相似性较高，目前几乎所有的重组AAV病毒载体的核心骨架都是来源于AAV2亚型，所以AAV2也是最早被广泛研究的AAV血清型。

AAV2是一种小型的非包膜病毒，直径约为20-25nm，属于I型嗜肺病毒。主要由一个外壳构成，这个外壳由60个亚基组建而成，主要包含三种多肽VP1、VP2和VP3，共同组成了一个能够保护其内部遗传物质的外壳结构，。

AAV2能够有效转导多种细胞类型，低免疫原性使得在体内表达可以持续较长时间，高转导效率和广泛的组织特异性使其成为传递修复基因至特定细胞的理想载体，已超过200项AAV相关的临床试验正在进行或即将完成。如：重组人5型腺相关病毒注射液（H101）是中国目前唯一获得批准的溶瘤病毒药物，主要用于治疗无法切除或术后复发转移的鼻咽癌患者；腺相关病毒载体OBP-301通过瘤内注射，联合免疫治疗食管癌，已进入Ⅰ期临床阶段；腺相关病毒载体AdVince通过瘤内注射治疗神经内分泌瘤，目前处于Ⅰ/Ⅱa期临床试验阶段。

AAV NAbs

在AAV基因治疗中，抗AAV中和抗体（Neutralizing Antibodys, NAbs）与AAV结合，影响病毒与靶细胞表面受体结合，导致显著降低载体的转导效率和有效性，直接影响基因治疗的效果。另外AAV与NAbs形成的复合物也可能引起一系列的免疫反应，影响基因治疗的安全性。

NAbs可以在自然感染AAV后形成，也可能在AAV载体给药后产生。AAV Nabs可能来源于患者体内预存的AAV抗体，来自自然感染导致的免疫记忆或是交叉反应性，大约有30-60%的人群体内有预存的中和抗体。亦或是在高剂量或者系统性给药时，AAV载体在体内可能引发宿主的免疫反应产生Nabs。

筛查AAV NAbs是一个重要步骤，目前用于检测AAV Nabs的主要方法是基于细胞的检测和配体结合测定法（间接ELISA或者化学发光法），通过这些方法对预存抗体的检测、中和试验和总抗体测定都是确保基因治疗有效性和安全性的关键环节。

目前已有多项监管指南将筛查AAV抗体纳入到伴随诊断检测项目中，CDx的上市申请和AAV基因治疗的生物制剂许可申请应协调一致。AAV抗体检测在系统性基因治疗中至关重要，它不仅影响治疗效果，也是确保患者安全的关键因素。

参考文献

[1] Mendell, Jerry R. , et al. "Testing preexisting antibodies prior to AAV gene transfer therapy: rationale, lessons and future considerations." Molecular therapy. Methods & clinical development 25(2022):74-83.

基因治疗中不可或缺的AAV抗体