艾美捷PARP2比色检测试剂盒,探索DNA损伤修复机制
PARP2,也称为聚(ADP-核糖)聚合酶2或NAD⁺ ADP-核糖基转移酶2,是PARP家族的一部分。ADP核糖基化(即将ADP-核糖添加到蛋白质上)是一种可逆的蛋白质翻译后修饰,主要涉及DNA损伤响应(DDR)途径。聚ADP核糖基化(称为PARylation)是添加线性或分支的ADP核糖链。PARP2参与DNA修复(只有10%的PARP活性归因于PARP2),但也参与氧化应激和线粒体分裂。DDR和氧化应激途径的功能失调可能导致肿瘤发生。PARP2的基因敲除表明其在脂肪生成、精子生成和胸腺细胞存活中的作用。PARP2也是核受体(如雌激素受体ER和过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR)的辅助因子。PARP2在前列腺癌(PCa)中过表达,可能通过FOXA1(叉头框蛋白A1)/AR途径促进疾病发展。PARP抑制剂已在癌症治疗中取得成功,临床上批准的抑制剂同时靶向PARP1和PARP2。进一步了解涉及PARP2的分子途径及其对疾病的影响,将继续为PARP2相关疾病的新疗法铺平道路。
PARP2比色法检测试剂盒旨在用于检测PARP2(聚(ADP-核糖)聚合酶2)活性,适用于筛选和分析应用。PARP2检测试剂盒采用便捷的96孔板格式,包含100次酶反应所需的纯化PARP2酶(氨基酸2-583)、反应底物和PARP检测试剂缓冲液。组蛋白蛋白预先包被在96孔板上。接下来,将生物素化的NAD⁺混合液(称为PARP底物混合液)与PARP2酶和活化的DNA模板在优化的检测试剂缓冲液中孵育。然后,将链霉亲和素-HRP处理该板,随后加入比色法HRP底物,生成有色溶液。生成的信号与PARP2活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PARP2比色检测试剂盒:
货号:80581
同义词:聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)转移酶2、ADPRT、PARP2、PARP-2
试剂盒格式:比色法
适用物种:人类
靶标:PARP2
储存/稳定性:当按照说明储存时,该检测试剂盒在收到之日起6个月内可达到最佳性能。
应用:研究酶动力学,并用于药物发现和高通量筛选(HTS)应用中的小分子抑制剂筛选。
运输温度:-80°C
所需材料(但试剂盒未提供)
1x PBS(磷酸盐缓冲液)
PBST缓冲液(1x PBS,含0.05% Tween-20)
能够在λ=450 nm处读取吸光度的紫外/可见光分光光度计微孔板读取器*
2 M硫酸(水溶液)
可调节微量移液器及无菌吸头
轨道振荡器
或者,也可以使用在650 nm处读取的分光光度计,但检测灵敏度将大大降低。
检测结果示例:

图:奥拉帕尼(Olaparib)和AZD-5305对PARP2活性的抑制作用
将PARP2与逐渐增加浓度的奥拉帕尼(Olaparib)和AZD-5305(编号#78318)共同孵育。使用Tecan紫外/可见光分光光度计微孔板读取器测量吸光度。
文献参考:
Brown, J.A., Marala, R.B. 2002. J. Pharmacol. Toxicol. Methods 47:137-41.
Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.
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作者:congcong
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来源:TechFM
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