WB(Western Blot)为什么要封闭?
一句话理解:
封闭 = 先把膜上的“空位”占满,避免抗体乱贴,从而降低背景,让条带更干净。
🔬 为什么要封闭?
在蛋白转膜之后,PVDF / NC 膜上除了你想检测的目标蛋白位置,还有很多“空白区域”。
这些空位会 吸附抗体,就像便利贴随便贴在墙上任何地方。
如果不封闭就会出现:抗体会乱黏 → 高背景、条带模糊、脏脏的、出现杂带、斑点、发雾、曝光像雾里看花,一团糊
封闭就是在这些空位上先涂一层“无关蛋白”,
让抗体无处乱贴,只能去找你真正想检测的目标蛋白。
用类比记住:
封闭就像先铺桌布,再摆菜。
不铺桌布,油污会沾桌子;
不封闭,抗体会乱黏膜。

共有 0 条评论