一分钟掌握病毒的保存、分装和稀释

病毒储存

短期保存:病毒原液可短期存放于-20℃。

长期保存:建议采用甘油低温保存法,将病毒液与灭菌甘油按体积比1:1混合(甘油终浓度15%-30%),分装后保存于-80℃超低温冰箱,可稳定保存。

宿主保存:部分病毒(如慢病毒)可通过转导宿主细胞后冻存宿主菌或细胞系,复苏后重新扩增病毒。

病毒分装

病毒的反复冻融会影响病毒活力,因此需在生物安全柜内,使用无菌EP管或冻存管,按照实验需求分装病毒产品,避免多次取用同一管,建议每管分装量为单次实验用量的1.5-2倍。

病毒稀释

病毒原液的滴度较高,需根据实验需求确认是否需要稀释。常用稀释液有无菌PBS、培养基或含保护剂的缓冲液等,通常体内动物实验建议使用PBS稀释,体外细胞实验建议使用无血清培养基稀释。混匀过程需要轻柔吹打或低速涡旋,避免剧烈震荡导致病毒失活。

此外,病毒原液中含有冻存试剂,稀释后的病毒溶液中冻存剂含量大大降低,因此稀释后的病毒需要尽快用于实验,不建议重新在冰箱中冻存。

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作者:Mr李
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来源:TechFM
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