Epigentek丨艾美捷代理货号:P-9018 EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)试剂盒表观转录组学研究
在表观遗传学快速发展的今天,RNA修饰研究正成为新的前沿领域。其中,N6-甲基腺嘌呤(m6A)作为真核生物中最普遍存在的RNA修饰形式,其精准检测和定位对理解基因表达调控机制具有重要意义。EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)试剂盒 货号:P-9018在这一背景下应运而生,以其创新的技术设计和优越的性能表现,为研究人员提供了高效可靠的m6A研究解决方案。
Epigentek集团公司是创新技术和表观遗传学相关研究产品的开发商和供应商。公司开发了包括400多个专利产品的全面的产品组合,为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。各界备受推崇的学者、制药企业以及先进的生物技术公司都在使用Epigentek产品。相比普通方法的产品而言,这些独特的产品在科研分析过程中更简单、更快捷、更方便、更有效。
技术原理与创新特点
该试剂盒采用创新的比色法检测原理,基于ELISA-like的实验方案,通过特异性m6A抗体实现对RNA中m6A修饰的精准定量。其技术流程包括:首先利用特殊的高结合性结合溶液将大于70个核苷酸的RNA片段牢固地结合在微孔板上;随后使用特异性m6A捕获抗体和检测抗体进行识别反应;最后通过信号增强系统,在450nm波长下进行吸光度检测。整个检测过程仅需3小时45分钟即可完成,大大提高了实验效率。

N6-甲基腺苷(m6A)多克隆抗体Epigenase m6A去甲基化酶活性/抑制检测试剂盒(比色法)甲基闪尿液N6-甲基腺苷(m6A)定量试剂盒(比色法)Epigenase m6A甲基转移酶活性/抑制检测试剂盒(比色法)
技术原理的革命性突破
该试剂盒基于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术原理,这一方法相较于传统的ChIP技术具有显著优势。其核心创新在于利用RNA切割酶混合物同时实现RNA片段化和去除目标m6A序列两端的非特异性RNA序列,而不影响抗体结合的RNA区域。这种独特的工作机制确保了只有与抗m6A抗体结合的短RNA片段被保留,从而大幅降低了非特异性背景。
实验流程经过精心优化:首先通过磁珠结合的m6A捕获抗体对目标m6A片段进行下拉富集,随后释放并纯化富集的RNA。整个过程在同一试管中完成,最大限度地保护了目标m6A区域并减少了样品损失。从RNA到富集m6A RNA的整个流程仅需约2.5小时,其中手动操作时间不足30分钟,极大地提高了实验效率。
优质的性能特点
该试剂盒展现出多项突破性的技术优势:
高富集效率:通过特异性切割非目标区域,试剂盒能够实现真正的m6A富集区域识别,获得高分辨率定位结果。这种精准的富集能力使得在测序分析时仅需少于1000万读长即可获得可靠数据,显著降低了测序成本和分析负担。
低起始量要求:优化的单管操作流程使RNA起始量可低至500ng,这为临床样本和珍贵样品的研究提供了可能。建议的最佳使用量为10μg总RNA,但即使在低至1μg的输入量下仍能获得可靠结果。
优质的适用性:试剂盒适用于各种来源的RNA样品,包括从培养细胞、新鲜或冷冻组织、石蜡包埋组织、血液和体液样本等分离的RNA。这种广泛的适用性使其成为多学科研究的理想工具。
便捷的操作体验:试剂盒包含m6A序列捕获各步骤所需的所有组分,非免疫IgG对照和m6A阳性对照的配置,方便用户验证试剂盒效能和实验性能。
m6A的生物学意义与研究价值
m6A修饰占所有RNA碱基甲基化的80%以上,主要分布在mRNA中,同时也存在于tRNA、rRNA和snRNA等非编码RNA中。这种动态可逆的修饰由甲基转移酶复合物METTL3催化形成,并可由去甲基化酶FTO和ALKBH5以α-酮戊二酸和Fe2+依赖的方式去除。
研究表明,m6A修饰通过影响RNA的剪接、核输出、翻译能力和稳定性等多个代谢过程,在发育、代谢、生殖等生物学过程中发挥关键作用。异常的m6A甲基化水平与多种疾病密切相关,例如FTO突变导致的m6A水平异常降低与肥胖及相关疾病的发生有关。因此,对m6A水平和分布的深入研究将为疾病诊断和治疗提供重要线索。
技术应用与发展前景
该试剂盒富集的RNA特别适用于构建非条形码(单重)和条形码(多重)文库,能够以较小的偏差和高分辨率绘制m6A区域。这一特性使其在以下研究领域具有广阔应用前景:
基础机制研究:通过Illumina平台或其他方法的下一代测序,研究人员能够在全转录组范围内绘制m6A修饰图谱,深入探索m6A在特定生物学过程中的调控机制。
疾病标志物发现:m6A作为一种新型表观遗传标记,其异常修饰与多种疾病状态相关。该技术为发现新的疾病诊断标志物提供了有力工具。
药物研发:通过研究药物处理前后m6A修饰的变化,可以评估药物对表观转录组的调控作用,为新药开发提供重要依据。
临床转化研究:低起始量的特点使其能够应用于临床样本分析,为精准医疗提供技术支持。
操作流程的优化创新
试剂盒的操作流程经过精心设计和优化。独特的RNA切割步骤确保只有抗体保护的m6A区域得以保留,这种靶向富集策略显著提高了检测的特异性和灵敏度。磁珠分离技术的应用使得操作更加简便可靠,同时减少了交叉污染的风险。
试剂盒提供的质控系统包括非免疫IgG对照和m6A阳性对照,这些对照的设置确保了实验结果的可靠性和可重复性。用户可以在富集RNA定量或生物分析仪检测步骤中验证试剂盒的性能表现。
技术优势与市场定位
相比于传统的MeRIP方法,EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集试剂盒在多个方面展现出明显优势。其更高的富集效率、更低的起始量要求、更短的实验时间和更简便的操作流程,使其成为当前m6A研究领域的前沿工具。
该试剂盒的成功开发标志着m6A研究进入了新的阶段。其技术创新不仅解决了传统方法存在的背景高、分辨率低、所需样本量大等问题,更重要的是为表观转录组学研究提供了更加可靠和高效的技术平台。
随着单细胞测序技术和空间转录组学的发展,对低起始量样品中m6A修饰的研究需求日益增长。EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集试剂盒的技术特点正好满足这一发展趋势,有望在未来几年内成为表观转录组学研究的标准方法之一。
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作为Epigentek 的独家代理,艾美捷科技为中国客户提供包括DNA甲基化研究工具、染色质结构分析、组蛋白甲基化研究、乙酰化与去乙酰化分析、DNA损伤与修补、组蛋白磷酸化、蛋白泛素化等系列研究试剂盒和抗体产品等全系列解决方案。

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